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我司技术员曾多次强调过,在收集样本前都有一个完整的计划,清楚要检测的成份是否足够稳定,并且注意避免反复冻融,在检测实验前,样本的处理与保存时影响整个实验的因素之一!
在现在的小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。
注意的关键点是:
※ 加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。
※ 加样太快,无法微量加样的准确性和均一性。
※ 加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。
※ 溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。
※ 有时候一份标本用相同的elisa试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
正确加样方法如下图所示:
小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒操作方法
▲ 各种类型ELISA测定时一般需经过这些步骤:
固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
① 重复某一样品时,加样时间尽可能与次接近。
② 加样后在混匀器上充分混匀。
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